Vrste fluorescence Mikroskopi
epifluorescenčnim mikroskopi sijaj in zbiranje svetlobe skozi iste optike.
Dalečnajpogostejša fluorescenčni mikroskop jekonfiguracija epifluorescenčnim . V epifluorescenčnim mikroskopom ,svetlobni vir - navadnosrebro ali ksenonske luči - sije skozi filter , ki izbere ozko območje valovnih dolžin. Filtrirali sveti svetloba na vzorec skozi mikroskop objektiv . Prihodnje svetloba absorbira fluorofori - molekularna nalepk , ki oddajajo svetlobo z dolgo valovno dolžino , ko se absorbirajo svetlobo krajše valovne dolžine . Svetloba iz fluorofori , skupaj z razpršeno svetlobo iz vira osvetlitvijo , sega v objektiv in z detektorjem ali oči . Vzdolž poti , še filter blokira luči osvetlitvijo , tako da vse , kar je ostalo , jefluorescentna svetloba iz vzorca.
Konfokalna
epifluorescenčnim mikroskopom zbira svetlobo povsod v vidnem polju mikroskopa . Nekatere glede vzbujanja se absorbira preden goriščne ravnine mikroskopa , tudi na goriščni ravnini in nekateri preko goriščni ravnini . Kermikroskop zbira vse to svetlobo , se boslika vsebuje ostro sliko glede na poudarek , vendar pa bo tudi out- of- poudarkom svetlobe iz drugih regij. Konfokalni mikroskop določa , da se ga usmerimo laserski mesto v isti ravnini kot mikroskopom usmerjena . Natoluknjico gre pred detektorja , kjer se blokira vsasvetloba, ki ne prihaja iz mikroskopa poudarkom . S skeniranjem vzorec, je mogoče dobitičisto tridimenzionalna slika objekta .
Multiphoton
V fluorescenčni mikroskopsvetloba prihaja iz molekul v vzorcu.
V konfokalnim mikroskopomporavnava je zelo občutljiv. Če jelaserska pika ,cilj mikroskop, zbiralne optike inluknjico off niti najmanjšega zneskauspešnosti mikroskop trpi . Multiphoton mikroskop dobi okoli tega problema s pomočjo laserskih valovno dolžino , ki je le pol tako energična , saj mora biti za vzbujanje fluorofori v vzorcu . Edini način fluorofori bodo dobili razburjen in oddajajo fluorescenco je, čelaserska svetloba je dovolj svetla , da sta delci svetlobe - fotonov - stavke fluorofora v zelo kratkem času. To se zgodi šele, ko selaserska osredotočena na zelo majhnem kraju . Torej,edini kraj v vzorcu , ki bo oddajajo svetlobo je, če jelaser osredotočen , ki ohranja podobo lepo in čisto , ker ni dodatno ozadje luč , da se znebite - . Kar pomeni, da ne luknjico , da se uskladi
Fluorescenčni Odsev
skupno notranjo ( TIRF )
en vzorec, ki ima lahko več fluorofore .
Drug način, da dobite zelo čiste slike je zagotoviti,svetloba vzbujanje ni prišel prav daleč v vzorec . ČeNič nevronov , na primer , je postavljena v kapljice raztopine na objektno steklo , nato pa nekateri nevroni držijo površine stekla . V skupno notranjo razmislek fluorescence ( TIRF ) mikroskopa jesvetloba usmerjena vstran v stekelce , da ne res uspelo v raztopino , ki je imetnik celice . Vendar pa nekateri glede komaj pušča v raztopini - le zelo blizu površine stekla . To pomeni le kraji, ki oddajajo svetlobo bo v zelo tanko regiji desno navzgor proti stekleni površini . Nekaj podobnega nevronov , kjer je toliko zanimivih stvari se dogaja na površini celic , lahko ta tehnika je zelo učinkovita
Super Resolution
Vse mikroskopi . - vključno fluorescentne mikroskope - so omejeni s fiziko , ki veljajo za širjenje svetlobe. Eno od osnovnih pravil je, da lahkousmerjena spot luči dobil le tako majhna - in nič manjši. Za vidno svetlobo , ki znaša približno 200 nanometrov ali 200/1000000000 metra . Ampak posameznih molekul le nekaj nanometrov v velikosti , tako da obstaja veliko zanimivih funkcij, ki so pod to mejo velikosti , ki se imenujelimit uklon. Znanstveniki razvijajo " super ločljivosti " tehnike na skrivaj okoli te meje . Strukturiran osvetlitev mikroskopija (SIM ) in stimulirana izčrpavanje emisij ( Komen ) mikroskopija , na primer, sta obe metodi fluorescenčno mikroskopijo , ki omejujejo velikost svetleči kraju samem krčenje velikost vzbujanje svetlobne točke .