Kakšna je globinska ostrina na mikroskopu?

Globinska ostrina (DOF) mikroskopa je razpon razdalj od leče objektiva, na kateri so predmeti videti ostro izostreni. Določena je z numerično odprtino (NA) leče objektiva in valovno dolžino uporabljene svetlobe.

DOF je obratno sorazmeren z NA, kar pomeni, da ima leča objektiva z višjo NA manjšo DOF. To je zato, ker ima leča objektiva z višjo NA ožji svetlobni stožec, kar pomeni, da izostri manjšo površino vzorca.

DOF je tudi obratno sorazmeren z valovno dolžino svetlobe, kar pomeni, da ima krajša valovna dolžina svetlobe manjši DOF. To je zato, ker se krajše valovne dolžine svetlobe lažje ulomijo, kar pomeni, da se bolj razširijo, ko gredo skozi lečo objektiva.

DOF mikroskopa je pomemben, ker določa debelino vzorca, ki ga je mogoče videti izostreno. Vzorec, ki je debelejši od DOF, bo videti zamegljen ali neizostren.

DOF lahko povečate z uporabo objektiva z nižjo NA ali z uporabo daljše valovne dolžine svetlobe. Vendar bo to tudi zmanjšalo ločljivost mikroskopa. Zato je pomembno najti ravnovesje med DOF in ločljivostjo pri izbiri objektiva za določeno uporabo.

DOF mikroskopa se lahko izračuna z naslednjo formulo:

$$ DOF =\frac{2(n/NA)^2}{\lambda} $$

kje:

* DOF je globinska ostrina v mikrometrih

* n je lomni količnik potopnega medija

* NA je numerična zaslonka objektiva

* λ je valovna dolžina svetlobe v mikrometrih